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白魔芋组培技术研究

?作者: 组培设备 发布时间:2019-03-04 14:12?? 浏览次数:

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  以白魔芋球茎为外植体,研究白魔芋组培技术。结果表明,75%酒精30 s+0.1%升汞15 min消毒效果较好,污染率较低,为11.11%;6-BA 1 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L愈伤组织诱导效果较好,诱导率达到73.33%,且愈伤组织质量紧密;6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L诱导芽过程中,出芽时间较早,分化率最高,达到91.11%,且在芽生长过程中同时生长出根,比较适合芽诱导。

  白魔芋(A.ablus liu et Chen)为天南星科(Araceae)魔芋属多年生草本植物,因其地下球茎富含葡甘露聚糖而著名,自然分布在地处四川南部、云南北部的金沙江下游的屏山、金阳、绥江、雷波、永善、盐津等县。葡甘露聚糖具有良好的粘着性、膨胀性、悬浮性等理化性质,同时对人体有医疗保健功能,广泛应用于食品、医药、建筑等领域。近年来,白魔芋已发展成为宜宾市的地方特色经济作物之一。但白魔芋病害严重,繁殖时以球茎、根状茎为主,需种量大(一般为 7 500~9 000 kg/hm2),繁殖速度慢、周期长,繁殖系数低,不能满足生产用种的需要,已成为魔芋产业化生产的一大瓶颈,阻碍了魔芋产业快速发展。植物组织培养是一种十分有效的繁殖手段,进行了不同魔芋“种”的组织培养,获得再生植株。本试验以白魔芋球茎为外植体,通过白魔芋组培技术初步研究,探索白魔芋组培新技术。

  1 材料与方法

  1.1 试验材料

  供试材料为屏山县中都镇李家坝村某农户农田种植的白魔芋;实验室为宜宾市农科院检测中心二楼组培实验室。

  1.2 试验方法

  以白魔芋球茎为外植体进行不同消毒处理,然后将球茎洗净在自来水下冲洗2 h,削去一层薄外皮,用无菌水洗3~5遍,放在超净工作台中灭菌培养皿(高压灭菌过程中提前装入滤纸)上,切成0.5 cm3的块状,接入统一的培养基中,每个处理接种10瓶,每瓶接3块,3次重复。不同外植体消毒方式如表1所示,不同培养基设计如表2所示。

  2 结果与分析

  2.1 外植体不同消毒处理对组培过程中污染率的影响

  由图1可知,处理A5消毒效果好,15 d统计污染率为11.11%;处理A2次之,为13.33%;处理A3污染率最高,达到56.67%,且有褐变现象。

  表1 外植体消毒方式

  

 

  表2 供试培养基

  

 

  2.2 外植体在不同培养基中的愈伤组织诱导情况

  

 

  图1 外植体不同消毒处理方式对平均污染率的影响

  分别对白魔芋块茎在不同培养基中进行了诱导,暗培养30 d后统计愈伤组织诱导情况。由表3可知,各处理间差异显著,处理B4块茎愈伤组织平均诱导率最高,达到73.33%,且愈伤组织质量紧密,与处理B1、B3差异不显著,与处理B2、B5差异极显著;处理B2愈伤组织平均诱导率最低,为45.55%,愈伤组织少有疏松。

  表3 块茎在不同培养基中的诱导情况

  

 

  2.3 芽诱导培养结果

  将愈伤组织切成大小约0.5 cm的3小块,接种于芽诱导培养基中,每瓶接3个愈伤组织块,每种培养基接15瓶,在26~28℃、60%光强度、10 h/d光照条件下培养,21 d统计带芽愈伤组织数。由表4可知,处理C4、C5出芽时间较早,10 d左右就可见明显芽点。带芽愈伤组织个数,以处理C4最多,分化率达到90%以上;处理C6次之,分化率为88.89%。可以看出,处理C4为较佳诱导芽培养基,且各培养基分化出的芽,在生长过程中直接生根。

  表4 不同培养基对芽诱导的影响

  

 

  3 结论与讨论

  本试验中,消毒处理中以75%酒精30s+0.1%升汞15min消毒效果较好,污染率较低,为11.11%,褐变较少。对于用有NaClO的处理出现褐变较重的现象,可能是由于其氧化的作用,导致外植体褐变。

  在愈伤组织诱导中,以6-BA 1 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L效果较好,诱导率达到73.33%,且愈伤组织质量紧密,比较适合白魔芋愈伤组织诱导。芽诱导培养中,以6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L、6-BA 2 mg/L+NAA 0.01 mg/L 出芽时间较早,尤以前者分化率最高,达到91.11%,且在芽生长过程中同时生长出根,比较适合芽诱导。本试验研究条件有限,更细致的结果还有待进一步的研究和提升。

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